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            ADC熱穩(wěn)定性如何評價?
            時間:2022-08-04 16:08 點擊次數(shù):30

            差示掃描量熱分析(Differential Scanning Calorimetry,簡稱DSC),是在過程控制溫度下,測量輸入到試樣和參比物的能量差隨溫度或時間變化的一種免標記(label-free)技術。通過這些測量,可以表征蛋白質結構穩(wěn)定性以及特異性或非特異性蛋白質-配體結合,并定義了各結構域的穩(wěn)定性及其相互作用。儀器測試原理根據(jù)測量方式的不同,差式掃描熱儀一般可以分為兩種:功率補償型和熱流型,兩者最大的區(qū)別在于結構設計的原理不同。

            功率補償型DSC的原理功率補償型差示掃描量熱法是采用零點平衡原理。該類儀器包括外加熱功率補償差示掃描量熱計和內(nèi)加熱功率補償差示掃描量熱計兩種。外加熱功率補償差示掃描量熱計的主要特點是試樣和參比物仍放在外加熱爐內(nèi)加熱的同時,都附加有具有獨立的小加熱器和傳感器,即在試樣和參比物容器下各裝有一組賽貝克(Seeback)熱電裝置。整個儀器由兩個控制系統(tǒng)進行監(jiān)控,其中一個控制溫度,使試樣和參比物在預定速率下升溫或降溫,另一個控制系統(tǒng)用于補償試樣和參比物之間所產(chǎn)生的溫差,即當試樣由于熱反應而出現(xiàn)溫差時,通過補償控制系統(tǒng)使流入補償熱電傳感器的電流發(fā)生變化。

            例如當試樣吸熱時,補償系統(tǒng)流入試樣側加熱器的電流增大;試樣放熱時,補償系統(tǒng)流入?yún)⒈任飩燃訜峤z的電流增大,直至試樣和參比物二者熱量平衡,溫差消失。這就是所謂零點平衡原理。




            功率補償型差示掃描量熱法原理S—試樣;R—參比物;1—溫度敏感元件;2—加熱器

            熱流型DSC的原理熱流型差示掃描量熱法主要通過測量加熱過程中試樣吸收或放出熱量的流量來達到DSC分析的目的,有熱反應時試樣和參比物仍存在溫度差。該法包括熱流式和熱通量式,兩者都是采用差熱分析的原理來進行量熱分析。熱流式差示掃描量熱儀的構造與差熱分析儀相近,它利用康銅電熱片作試樣和參比物支架底盤并兼作測溫熱電偶,該電熱片與試樣和參比物底盤下面的鎳鉻絲和鎳鋁絲組成熱電偶以檢測差示熱流。

            當加熱器在程序控制單元控制下加熱時,熱量通過加熱塊對試樣和參比物均勻加熱。由于在高溫時試樣和周圍環(huán)境的溫差較大,熱量的損失較大。因此在等速升溫的同時,儀器自動改變差示放大器的放大系數(shù),溫度升高時,放大系數(shù)增大,以補償因溫度變化對試樣熱效應測量的影響。

            基本應用差示掃描量熱儀的基本應用包括:材料的熔點測定、熱歷史研究、結晶度測定、油和蠟的熱分析、固化轉變、原材料分析、玻璃化轉變溫度的測量、結晶溫度測量、粘流轉變溫度測量、氧化誘導時間測量、比熱測量、等溫結晶及等溫動力學研究、純度測量等,廣泛應用于材料、生物、食品、醫(yī)藥、臨床、冶金、地質、礦產(chǎn)、航空航天、石化、軍事考古等領域。

            在生物醫(yī)藥領域,差示掃描量熱技術(DSC)常用來評價重組蛋白藥物也包含抗體偶連藥物(ADC)。例如在對熱穩(wěn)定性的評估分析手段上,DSC是目前最常用的測量蛋白質熱穩(wěn)定性的方法,不僅可以得到變性溫度,還可以得到蛋白質變性的焓、熵和自由能等信息。

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